Dia 2
A minha primeira electroforese, após o meu primeiro PCR!! Estou tão orgulhosa! O DNA que extraí ontem funcionou!
Hoje o dia começou com uma caixa de Petri cheia de Drosophila mutantes e selvagens, com o objectivo de distinguir machos e fêmeas. Pois sim... Nas selvagens ainda se distingue bem, até a olho nu, mas nas mutantes... é para o tecto! Não se vê nada.
A seguir, 18 páginas em inglês retiradas do livro "Genetics - Analysis of genes and genomes" para ler durante os tempos mortos. Já sabia a maior parte do que lá estava escrito, principalmente no que toca às enzimas de restrição, mas tinha coisas bem complicadas como a história das cadeias 5'-3' e o facto de os nucleótidos se ligarem de uma forma específica: o grupo fosfato no carbono 5' de uma pentose está ligado grupo -OH ligado ao carbono 3' da pentose seguinte. Acho que é isto, mas sinceramente nunca percebi muito bem isto do 5'-3'. Enfim...
Depois comecei a preparar tudo para fazer o PCR nos termocicladores (que são as máquinas onde o PCR é feito). Já não sei o que juntei... Acho que era uma solução tampão, com dNTP's, uma polimerase termoestável (Taq polimerase), primers e o DNA que queria copiar, claro...
E depois... Electroforese!!!
Estou a aprender imenso, mesmo!
Hoje o dia começou com uma caixa de Petri cheia de Drosophila mutantes e selvagens, com o objectivo de distinguir machos e fêmeas. Pois sim... Nas selvagens ainda se distingue bem, até a olho nu, mas nas mutantes... é para o tecto! Não se vê nada.
A seguir, 18 páginas em inglês retiradas do livro "Genetics - Analysis of genes and genomes" para ler durante os tempos mortos. Já sabia a maior parte do que lá estava escrito, principalmente no que toca às enzimas de restrição, mas tinha coisas bem complicadas como a história das cadeias 5'-3' e o facto de os nucleótidos se ligarem de uma forma específica: o grupo fosfato no carbono 5' de uma pentose está ligado grupo -OH ligado ao carbono 3' da pentose seguinte. Acho que é isto, mas sinceramente nunca percebi muito bem isto do 5'-3'. Enfim...
Depois comecei a preparar tudo para fazer o PCR nos termocicladores (que são as máquinas onde o PCR é feito). Já não sei o que juntei... Acho que era uma solução tampão, com dNTP's, uma polimerase termoestável (Taq polimerase), primers e o DNA que queria copiar, claro...
E depois... Electroforese!!!
Estou a aprender imenso, mesmo!
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